腺相关病毒载体的优化及其在肺癌基因治疗中的应用
　　获奖奖项: 2008年江苏省科技进步奖三等奖
　　主要完成人: 吴剑卿等
　　项目简介： 本项目针对基因治疗的关键环节，较系统地研究了提高腺相关病毒(adeno-associated virus, AAV)载体基因转导效率的策略；并以优化的新型AAV载体介导免疫刺激分子CD40L基因进行肺癌治疗的初步研究。
　　主要研究内容和技术指标：①进一步证明AAV的病毒DNA第二链合成是AAV基因转导的限速步骤，为开发和应用自身互补的双链AAV(scAAV)提供了理论基础；②通过基因工程技术，改造经典单链AAV，构建、包装获得自身互补的双链AAV，并证实其转导效率较经典单链AAV显著提高；③构建一系列含不同大小基因片段的去除经典AAV中一侧ITR的D-序列和Trs位点的AAV质粒，探明了scAAV的最大包装容量为3.3kb；并改进包装技术，提高了双链病毒的比例，为其合理的应用奠定基础；④首先探索了AAV1,2, 5-10共8种血清型在肺癌细胞中的基因转导效率，发现AAV5为肺癌细胞中转导效率最高的血清型，并证明在肺癌细胞中双链AAV5(scAAV5)较单链AAV5(ssAAV5)的转导效率显著提高；⑤联合应用新血清型AAV5、scAAV及其包装技术，以scAAV5介导CD40L基因进行肺癌的基因治疗，在体外体内实验中获得初步疗效，为肺癌的基因治疗提供了实验依据。
本项目相当于国际同类研究工作的水平。其中scAAV载体的系列研究成果不仅可以应用于肺癌的基因治疗，而且可以广泛应用于其他基因治疗领域。本项目应用scAAV5 介导CD40L基因治疗在体内体外研究中均取得了初步疗效，有望成为肺癌治疗的有效方法，具有重要的临床价值，其推广应用前景广阔。相关研究结果已多次在全美基因治疗年会等国际会议大会报告，曾获得2006年全美基因治疗年会Travel Grant Awarding。研究结果分别在《Human Gene Therapy》、《Molecular Therapy》、《Gene Therapy》和《Virology》等期刊发表，并在国内数家医疗研究单位推广应用。

　　腺相关病毒载体的优化及其在肺癌基因治疗中的应用
　　获奖奖项: 2008年江苏省科技进步奖三等奖
　　主要完成人: 吴剑卿等
　　项目简介： 本项目针对基因治疗的关键环节，较系统地研究了提高腺相关病毒(adeno-associated virus, AAV)载体基因转导效率的策略；并以优化的新型AAV载体介导免疫刺激分子CD40L基因进行肺癌治疗的初步研究。
　　主要研究内容和技术指标：①进一步证明AAV的病毒DNA第二链合成是AAV基因转导的限速步骤，为开发和应用自身互补的双链AAV(scAAV)提供了理论基础；②通过基因工程技术，改造经典单链AAV，构建、包装获得自身互补的双链AAV，并证实其转导效率较经典单链AAV显著提高；③构建一系列含不同大小基因片段的去除经典AAV中一侧ITR的D-序列和Trs位点的AAV质粒，探明了scAAV的最大包装容量为3.3kb；并改进包装技术，提高了双链病毒的比例，为其合理的应用奠定基础；④首先探索了AAV1,2, 5-10共8种血清型在肺癌细胞中的基因转导效率，发现AAV5为肺癌细胞中转导效率最高的血清型，并证明在肺癌细胞中双链AAV5(scAAV5)较单链AAV5(ssAAV5)的转导效率显著提高；⑤联合应用新血清型AAV5、scAAV及其包装技术，以scAAV5介导CD40L基因进行肺癌的基因治疗，在体外体内实验中获得初步疗效，为肺癌的基因治疗提供了实验依据。
       本项目相当于国际同类研究工作的水平。其中scAAV载体的系列研究成果不仅可以应用于肺癌的基因治疗，而且可以广泛应用于其他基因治疗领域。本项目应用scAAV5 介导CD40L基因治疗在体内体外研究中均取得了初步疗效，有望成为肺癌治疗的有效方法，具有重要的临床价值，其推广应用前景广阔。相关研究结果已多次在全美基因治疗年会等国际会议大会报告，曾获得2006年全美基因治疗年会Travel Grant Awarding。研究结果分别在《Human Gene Therapy》、《Molecular Therapy》、《Gene Therapy》和《Virology》等期刊发表，并在国内数家医疗研究单位推广应用。